DMEM培養基的誕生是在BME培養基基礎上，使氨基酸和維生素濃度均增加4倍，并額外補充非必需氨基酸（甘氨酸和絲氨酸）、檸檬酸鐵、丙酮酸等成分；葡萄糖濃度可提高至25mM（高糖），DMEM多用于哺乳動物貼壁細胞的培養。
特點：
-GMP級別，含有丙酮酸鈉和1000mg/L的葡萄糖；
-用于多種哺乳動物貼壁培養，如：成纖維細胞、Hela、293等實體瘤細胞；
-不含蛋白質、脂類和生長因子，需要添加胎牛血清或培養添加物后使用。
-RPMI 1640培養基是專為淋巴樣細胞培養而設計的，（Roswell Park Medical Institute，RPMI）G.E. Moore在5A培養基基礎上，在維持無機鹽濃度和培養基滲透壓的前提下，主要對氨基酸、鈣和鎂濃度進行優化，開發出用于培養淋巴細胞的RPMI 1640培養基。
DMEM培養基中各種組分的作用及添加依據：
Hepes（羥乙基哌倩乙硫磺酸，238.3）：25mM/L（5.9575g/L），不加碳酸氫鈉時pH為6.7±0.3，加碳酸氫鈉時pH為7.0±0.3。單獨配制時，配制為100X即0.6g/ml。配制2.5M/L（0.6g/mL）Hepes：12g的Hepes定容到20mlPBS中，過濾除菌，分裝為1ml/管，－20C保存。Cell Biology建議為4℃保存。
HEPES是一種非離子緩沖液，在pH7.2-7.4范圍內具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒.HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加，在這種培養條件下，細胞培養瓶的蓋子應擰緊，以防止培養液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。
